Giannopoulou等[5]发现,尼古丁浓度1~10 μg/ml时,牙龈成纤维细胞产生胶原能力未发现明显变化;当尼古丁浓度50~500 μg/ml时,胶原产生逐渐减少,由正常的75%下降到40%,这可能是尼古丁直接抑制胶原合成的中间环节或胶原底物的合成。也有部分原因是尼古丁间接刺激导致。Ho等[6]发现,尼古丁增强牙龈成纤维细胞环氧酶(COX)-2表达。COX-2是前列腺素合成的限速酶,COX-2的增加导致体内前列腺素水平的增加,从而降低成纤维细胞内Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA的含量,抑制胶原的生成。
尼古丁抑制牙龈成纤维细胞胶原合成同时也加速胶原降解。胶原降解过程主要由胶原酶催化。因这些酶需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子,所以又被称为基质金属蛋白酶(MMPs)。在Zhou 等[7]实验中,尼古丁浓度150~250 μg/ml之间时,胶原降解随着尼古丁浓度上升而增强。此时尼古丁组和不含尼古丁组各种基质金属蛋白酶MMPs mRNAs水平没有区别,仅是尼古丁组基质金属蛋白酶特异性抑制物(TIMP-1)水平显著下降。这表明尼古丁并不直接增加胶原酶合成,而是通过增强活性转化,降低失活等其它一些途径增强胶原酶活性,促进胶原降解。
牙龈成纤维细胞除了分泌胶原外,还分泌其它一些基质蛋白,如纤维粘连蛋白(fibronectin)、整合素β1(Integrin β1 )[8]。牙龈成纤维细胞在底物表面的铺展、附着及移行需要这些细胞外基质的参与。
2.3 烟草对牙龈成纤维细胞产生细胞因子的影响健康牙周组织中,牙龈成纤维细胞分泌大量的细胞因子,调节着细胞间的相互作用,调节着细胞的移动、增殖、分化和产生基质成分,在维持着内环境的稳定中发挥作用。Almasri等[9]发现,250 μg/ml尼古丁作用体外培养牙龈成纤维细胞48 h后, IL-1、IL-6、IL-8等促炎因子水平显著增强,它们可直接或通过诱导其它因子生成参与牙槽骨吸收、胶原酶产生、趋化炎性细胞聚集等一系列造成组织破坏的炎性反应。与此同时,也发现抗炎因子IL-10水平增高。这可能是牙龈成纤维细胞代偿促炎因子增加的结果。