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兔下颌钛种植体周多糖-蛋白复合物及糖基在骨愈合中的动态研究
来源:不详2012-6-28收藏投稿
周,再经10%EDTA(0.1 mol/L Tris/HCl缓冲液配制,pH7.0)脱钙8周后,按常规脱水,包埋,切片,进行下述染色。

1.2.1  爱尔蓝及过碘酸-西夫试剂染色法 染色结果可显示并鉴别各种不同性质的蛋白多糖(PG)的分布及相对含量。PAS红色显示中性糖蛋白;pH 2.5 AB蓝色显示酸性PG;pH 1.0 AB蓝色显示硫酸化PG;0.06 mol/L MgCl2AB蓝色显示酸性PG;0.3 mol/L MgCl2 AB蓝色显示硫酸化PG;0.5 mol/L MgCl2 AB蓝色显示强硫酸PG。
1.2.2 植物血凝素糖基染色法(Lectin法) 棕黄色显示阳性反应:Con A阳性显示葡萄糖基(glucose,Glc);PNA阳性显示半乳糖基(galactose,Gal);WGA阳性显示乙酰氨基葡萄糖基(N- acetylglucosamine,GlcNAc);PHA-E阳性显示乙酸氨基半乳糖基(N-acetylgalactosamine, GalNAc);WPL阳性显示岩藻糖基(fucose,Fuc)。根据不同方法所显示不同颜色深浅,将染色程度分为六级:强阳性,次强阳性,阳性,+弱阳性,±可疑,-阴性。

2 结 果

2.1 组织学观察结果

正常牙周膜由致密而排列有序的胶原纤维束及其间丰富的成纤维细胞、神经、血管组成,固有牙槽骨内骨质致密,骨陷窝较多,分布规整。钛种植体植入1周,其与固有牙槽骨间可见大量结缔组织,近种植体处较致密,纤维平行排列,形成结缔组织膜。沿固有牙槽骨边缘,可见分支状新生骨组织向种植体周结缔组织中增生,新骨基质着色稍浅,周围可见立方状成骨细胞,也可见成骨细胞埋在基质中,胞核较大,可见胞浆。成骨活跃处,毛细血管丰富,部分固有牙槽骨周可见破骨细胞。

钛种植体植入1月,新生骨组织继续向种植体方向增生,并相互吻合成网状,钛周结缔组织明显减少。
钛种植体植入6个月,新生骨组织充满种植体周间隙,骨小梁彼此融合,形态上接近于固有牙槽骨,部分新生骨似与种植体表面直接接触,钛种植体与骨之间结缔组织极薄且不连续。
2.2 多糖-蛋白复合物及糖基染色结果
2.2.1 钛周结缔组织膜染色 钛周结缔组织膜中多糖-蛋白复合物尤其是PG含量明显高于正常牙周膜,并且在种植术后各个实验程期都保持较高水平,糖基染色结果有同样规律,此外近钛结缔组织中可见许多棱形成纤维细胞,其内糖基含量较高(表1)。

2.2.3 骨细胞染色结果 新生的成骨细胞内含有较多的多糖-蛋白复合物及糖基,但当其被基质包埋而成为骨细胞且基质钙盐沉着后,上述物质减少。

3 讨 论

本实验结果显示,种植体周结缔组织膜中多糖-蛋白复合物,尤其是PG及糖基含量明显高于正常牙周膜,并且在种植术后各个实验程期都保持较高水平,说明多糖-蛋白复合物及糖基在种植体形成骨附着的过程中及在维持钛的生物相容性方面可能具有重要作用。许多学者报道了在骨附着的过程中,种植体与骨之间出现了一20~40 nm宽

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